gorlum_lj: Они убили Олеся!!!

Пишет Мордовский интеллигент (

gorlum_lj)
@ 2016-10-28 02:25:00

	(Анонимно) 2016-10-28 03:14 (ссылка)
	беляш хули тебе не постоять на голове в самом прямом смысле слова. (Ответить)

	(Анонимно) 2016-10-28 03:15 (ссылка)
	нарасти себе мозг. мост. но может подстриги мозг? хехе (Ответить)

	(Анонимно) 2016-10-28 03:30 (ссылка)
	да неужели может им денег дать (Ответить)

	(Анонимно) 2016-10-28 05:01 (ссылка)
	мне показалось, что это лосось и написал полез искать, где это он у себя писал, и чуть не ебанулся, погружаясь в черные бездны лососевой шизофрении оказалось из уралосрача тьфу (Ответить) (Ветвь дискуссии)

	gorlum_lj 2016-10-28 14:42 (ссылка)
	Уралтрейдлизинг. Редкостные пидорасы в плохом смысле слова. (Ответить) (Уровень выше)

всё неймётся, оленевод?
(Анонимно)
2016-10-28 12:25 (ссылка)

ДНК спермы лосося (точнее, не из спермы, а из молок, если по-русски) используется при гибридизации для связывания с потенциальными неспецифическими мишенями, чтобы потом зонд на них не лип.

Блот-гибридизация ДНК
Материалы
• Предгибридизационный буфер: 5 х SSPE, 5 х раствор Денхардта, денатурированная и обработанная ультразвуком ДНК спермы лосося, 100 мкг/мл, 0,1% (о/о)ДСН. При работе с найлоновыми фильтрами концентрацию ДСН необходимо увеличить
• Гибридизационная смесь: 5 х SSPE, 5 х раствор Денхардта, денатурированная и обработанная ультразвуком ДНК спермы лосося, 100 мкг/мл, 0,1% (о/о) ДСН, 10% декстрансульфат, денатурированный меченый зонд0. При работе с найлоновыми фильтрами концентрацию ДСН необходимо увеличить до 1% (о/о).
• Буфер для отмывания 1: 2 х SSC, 0,1 % ДСН
• Буфер для отмывания 2: 0,25 х SSC, 0,1 % ДСН
• 20 x SSC
• 20 х SSPE: 3 М NaCl, 0,3 М фосфат натрия, 40 мМ ЭДТА, рН 7,2
• 100 х раствор Денхардта: 2% (в/о) БСА, 2% (в/о) фиколл-400, 2% (в/о) поливинилпирролидон-360
Методика
1. Замачивают фильтр с иммобилизованной ДНК в воде и помешают его в пластиковый пакет.
2. Добавляют предгибридизационный буфер (из расчета 10 мл буфера на 100 см2 фильтра), удаляют из пакета все пузырьки воздуха и запаивают его. Помешают пакет между двумя стеклами и проводят предгибридизацию при 65 °С в течение 2-4 ч.
3. Срезают один из углов пакета, сливают буфер.
4. Добавляют в пакет с фильтром гибридизационный буфер, содержащий денатурированный зонд (из расчета 4 мл буфера на 100 см2 фильтра). Для денатурации зонд можно прогреть в кипящей воде в течение 10 мин.
5. Выдавливают из пакета все пузырьки воздуха и снова его запаивают. Помешают пакет между двумя стеклами и проводят гибридизацию при 65 °С в течение 16 ч.
6. Осторожно, чтобы не повредить фильтр, вскрывают пакет и сливают гибридизационную смесь. Эту смесь можно использовать повторно. Если зонд помечен радиоактивным изотопом, следует обеспечить его безопасное хранение и правильное захоронение радиоактивных отходов.
7. Несколько раз ополаскивают фильтр в буфере для отмывания 1 и выдерживают в трех сменах того же буфера при комнатной температуре, по 5 мин в каждой смене.
8. Промывают фильтр при комнатной температуре в трех сменах буфера для отмывания 2, по 5 мин в каждой смене.
9. Промывают фильтр при температуре 55—65 С в трех сменах буфера для отмывания 2, по 30 мин в каждой смене.
10. Аккуратно промокают фильтр и заворачивают его в пластиковую пленку.
11. При работе с изотопно меченными зондами проводят радиоавтографию в специальной кассете. Снизу в кассету помещают усиливающий экран, на него кладут рентгеновскую пленку и сверху помещают фильтр так, чтобы сторона с ДНК была обращена к пленке. Если используются нерадиоактивно меченные зонды, то фильтры обрабатывают блокирующими агентами, чтобы предотвратить фоновое окрашивание при обработке фильтра детектирующими реактивами. Фильтр можно хранить во влажном состоянии при 4 °С.
12. Изотопно меченные зонды должны иметь удельную радиоактивность ~ 10 имп./мин на 1 мкг. Обычно достаточно, чтобы радиоактивность гибридизационной смеси составляла 106—107 имп./мин на 1 мл. Кинетика реассоциации нерадиоактивно меченных зондов немного отличается от таковой для Р-зондов, и для достижения оптимальной чувствительности необходима более высокая концентрация зонда. Эту концентрацию можно рассчитать по следующей формуле:
А = В/50*1/С*16/Д, где А — необходимая концентрация зонда (мкг/мл)
В — «сложность» зонда
С — концентрация декстрансульфата (в %)
D — время гибридизации (ч) Концентрация зондов, полученных методом ник-трансляции, обычно составляет 50-100 нг/мл.
- Для предотвращения утечки изотопно меченных зондов гибридизационный пакет помещают во второй запаянный пакет.
- Жесткость условий, при которых проводятся последние отмывания, можно повысить, уменьшив концентрацию SSC (до 0,1 x вместо 0,25 х). Это обычно не сопровождается снижением чувствительности.

(Ответить)

Учись, деревня:

gorlum_lj
2016-10-28 14:05 (ссылка)

Как высаживать грибы, если вы используете плодовое тело опенка:

Подбирайте исключительно перезревшие шляпки опят диаметром от 8 до 12 см. Нижняя сторона шляпок должна быть темно-коричневого цвета.
Отберите 10-20 шляпок и поместите их в ведро с природной нехлорированной водой. Водопроводная вода или вода из карьеров или других стоячих источников в данном случае не подходит.
Оставьте грибы в воде на сутки.
Разомните шляпки руками, не вынимая из воды, чтобы получилась кашеобразная масса.
Тщательно размешайте полученный раствор и профильтруйте его через несколько слоев марли.
Так вы получите болтушку из спор, которой необходимо полить подготовленные пни. Чтобы увеличить площадь заражения, на вертикальных поверхностях пней сделайте небольшие углубления и также налейте туда настой. Выемки лучше всего делать в шахматном порядке, чтобы грибы не мешали друг другу свободно расти. В одном небольшом пне достаточно сделать до 10 таких выемок.
Заделайте углубления влажными древесными опилками или собранным в лесу мхом. Таким образом, вы обеспечите максимальное сохранение влажности. Торцы пеньков следует оставить открытыми.
На один пень в среднем должно уходить до 1 л споровой болтушки. Споры будут «проклевываться» медленно, и первый урожай появится не раньше, чем через 1,5- 2 года после засева. Плодоносят такие опята на пнях на протяжении 5 лет. За это время пень обычно полностью разрушается, после чего плодовые тела перебираются на землю и прикрепляются к крупным корням ближайших деревьев.
Приготовьте субстрат, смешав отруби и древесные опилки в соотношении 1:3. Рекомендуется брать опилки от лиственных деревьев. Также опилки можно смешивать с гречневой шелухой, лузгой подсолнечника или искрошенные початки кукурузы. На самом деле, початки и семечки могут использоваться даже без опилок в качестве самостоятельного субстрата.
Замочите опилки в воде на сутки, отожмите и уложите его в банки объемом 3 л, наполнив их на ½.
При помощи длинной палочки диаметром до 2 см сделайте в субстрате углубления до самого дна.
Пастеризуйте банки, как если бы вы делали консервации на зиму. Это ликвидирует все патогенные микроорганизмы, и не даст развиться плесени. Поставьте банки в кастрюлю с горячей водой и прокипятите 60 мин. на слабом огне. На утро повторите процедуру еще раз.
Когда содержимое банок остынет примерно до 24С, закройте их пластиковыми крышками с дырочками диаметром до 2 мм.
Внесите мицелий через эти дырочки в количестве примерно 5-7% от общей массы основы. Для удобства можно воспользоваться медицинским шприцем.
Чтобы грибница проросла, необходимо подождать около 30 суток. Все это время банки должны находиться в теплом месте, температура воздуха в котором не должна опускаться ниже 20С (в идеале 23-24С).
Когда появились первые зачатки, банки следует перенести на подоконник, расположенный на северной стороне – грибы «любят» тень, и большое количество солнечных лучей может им навредить. В зимнее время банки можно вынести на балкон, если температура там не опускается ниже 13С.
Как только опята вытянутся до горлышка банки, крышку следует снять и обернуть горловину широкой полосой картона, соорудив своеобразный «воротник». Когда грибы вырастут за пределы банки, они будут расти в границах этой самой полоски. Периодически сбрызгивайте шляпки грибов, стараясь поддерживать оптимальную влажность на уровне 85-90%.
Урожай зимних опят из банок можно собирать уже через 2 недели после прорастания грибницы. Срезать их можно как обычные садовые цветы, а оставшиеся ножки просто выдергивать. Спустя пару недель вырастет новая партия грибов.
На выращивание опят в домашних условиях вы потратите не больше 45 суток, начиная от заражения субстрата мицелием до момента сбора долгожданного урожая. В одной банке на 3 л можно вырастить до 1,5 кг опят.

Купить мицелий зимнего опенка можно в специализированных растениеводческих магазинах или заказать через интернет. Напоследок, предлагаем вам ознакомиться с полезным видео об опятах и выращивании грибов в искусственно созданной среде:

(Ответить) (Ветвь дискуссии)

	Re: Учись, деревня: (Анонимно) 2016-10-28 14:13 (ссылка)
	прикольно а по panaeolus cyanescens есть гайд? (Ответить) (Уровень выше) (Ветвь дискуссии)

	Re: Учись, деревня: gorlum_lj 2016-10-28 14:43 (ссылка)
	Не баю шо вин такэ е. (Ответить) (Уровень выше) (Ветвь дискуссии)

	Re: Учись, деревня: (Анонимно) 2016-10-28 17:17 (ссылка)
	это данхилл мира культивируемых псилоцибиновых грибов (Ответить) (Уровень выше)

	Re: Учись, деревня: (Анонимно) 2016-10-28 14:17 (ссылка)
	кстати, пробовал ваши карельские семиланцеты хорошы! пиздатее кубов (Ответить) (Уровень выше)

	(Анонимно) 2017-05-25 12:46 (ссылка)
	без Волеро Кипяткова не то, нахуй надо (Ответить)